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動物miRNA載體構建
  miRNA調控機理復雜,每個miRNA可以有多個靶基因,而幾個miRNAs也可以調節同一個基因。這種復雜的調節網絡既可以通過一個miRNA來調控多個基因的表達,也可以通過幾個miRNAs的組合來精細調控某個基因的表達。隨著miRNA調控基因表達的研究的逐步深入,將幫助我們理解高等真核生物的基因組的復雜性和復雜的基因表達調控網絡。 
  信諾金達為您提供microRNA載體構建技術服務,您只需提供您要做的目的基因序列及登錄號,本公司專業的技術人員為您完成microRNA靶位點序列設計分析、及microRNA載體構建。

服務要求
  miRNA序列或者登錄號;
  具體的實驗要求:標記,載體等。
服務基本流程
  1. microRNA靶點的預測。利用軟件得到的目的microRNA的預測靶點。
  2. 獲得microRNA對應DNA模板。根據提供的靶序列,合成兩條互補的單鏈DNA模板。或者,設計引物PCR擴增microRNA靶基因3’UTR序列。
  3. microRNA靶序列克隆 。將合成的兩條單鏈退火成雙鏈(具有粘性末端),或將PCR產物雙酶切,后連入經過同樣雙酶切的miR-reporter載體中,連接產物轉化大腸桿菌。
  4. 陽性克隆鑒定。挑選轉化的菌落,PCR篩選含有插入片段的陽性克隆,測序驗證克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
  5. 實驗報告。
服務交付內容
  miRNA質粒或者菌液,測序報告和實驗報告
動物siRNA載體構建
  siRNA,即與內源mRNA編碼區同源的大約19-23nt的雙鏈小分子RNA,通過特定反應解鏈后會與mRNA發生特異性結合,導致mRNA降解而抑制特定基因的表達。基于上述原理,RNAi技術已廣泛應用于功能基因組學研究中,如:基因敲除、轉基因動物、模式動物、基因治療及藥物靶點篩選等研究。與化學合成siRNA相比,siRNA 質粒載體有以下優點: 
  1.siRNA載體能夠更有效阻遏相應基因的表達;
  2.更加穩定、易控制;
  3.可用于穩定的細胞系建立;
  4.可用于誘變系統的建立;
  5.可建立基因敲除的小鼠模型;
  6.含有GFP的載體可以用于監測轉染效率。
  7.成本低廉。
  基于其堅實的分子生物學平臺,信諾金達利用先進的siRNA設計軟件和豐富的siRNA載體資源可為您提供精確而完善的動物siRNA載體構建服務。
服務要求
  目的基因序列或者登錄號;
  具體的實驗要求:標記,載體等。
服務基本流程
  1. 選擇siRNA表達載體
  2. 設計siRNA靶序列
  3. 合成模板
  4. 酶切并測序鑒定
  5. 質粒轉染細胞后提取RNA、反轉錄、real-time PCR檢測干擾效果(您自備細胞系)。(可選)
  6. Western Blot檢測蛋白水平干擾效果(您自備一抗)。(可選)
服務交付內容
  siRNA質粒或者菌液,測序報告和實驗報告
服務編號
服務項目
內容說明
價格
周期
SGSV01
動物siRNA載體構建
siRNA載體構建,測序報告
¥4500/基因(1-3基因)
2-3周
SGSV02
¥4000/基因(4-10基因)
3-4周
SGSV03
詢價(>10個基因)
協商
SGSV04
動物siRNA載體構建和mRNA水平鑒定
siRNA載體構建,real-time PCR定量
¥12800/基因
6-8周
SGSV05
動物siRNA載體構建和蛋白質水平鑒定
siRNA載體構建,western blot鑒定
¥12800/基因
6-8周
SGSV06
動物siRNA載體構建、mRNA、蛋白水平鑒定
siRNA載體構建,real-time PCR,western blot鑒定
¥14800/基因
6-8周
SGSV07
動物miRNA載體構建
動物miRNA載體構建
¥3000/基因
3-4周
SGSV08
miRNA驗證載體構建
3'UTR克隆、Luc載體構建
¥3000/基因
3-4周
SGSV09
熒光素酶活性分析
luciferase activity assay
詢價
3-4周
 

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咨詢電話:010-56545250  QQ: 78001304

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克隆載體構建

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植物miRNA載體構建

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