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植物蛋白互作驗證 BiFC/LCI
     雙分子熒光互補 (Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC)是一項可直觀、快速判斷目標蛋白在活細胞中的定位和相互作用的新技術。將蛋白在某些特定的位點切開,形成不發熒光的N和C端2個多肽,稱為N片段(N-fragment)和C片段(C-fragment)。這2個片段在細胞內共表達或體外混合時,不能自發地組裝成完整的熒光蛋白,在該熒光蛋白的激發光激發時不能產生熒光。但是,當這2個熒光蛋白的片段分別連接到1組有相互作用的目標蛋白上,如果目標蛋白質之間有相互作用,則在激發光的激發下,產生該熒光蛋白的熒光。反之,若蛋白質之間沒有相互作用,則不能被激發產生熒光。
技術原理

螢火蟲熒光素酶片段互補圖像技術(LCI)是近年來形成的研究蛋白互作的新技術,把2個目標蛋白分別連接于螢火蟲熒光素酶的C端和N端。如果2個蛋白互作,N段和C端接近形成有活性的熒光素酶。基于煙草瞬時表達的LCI技術將LCI技術與煙草瞬時表達相結合,在研究植物蛋白的相互作用中,可以實現活體細胞內實時、定量分析;不受植物自發熒光的干擾;而且操作簡單,不需要裂解細胞提取蛋白質,可以很好的反映植物生理條件下蛋白的互作狀態。
實例圖片
服務要求
    1.基因序列或構建好的質粒。
    2.提供新鮮或保存完好的植物組織或RNA。
服務基本流程
    1.基因克隆,BiFC/LCI載體構建;
    2.轉煙草;
    3.觀察;
    4.實驗報告。
交付數據及材料
    1.完整的實驗報告,包括原始數據、詳細的實驗步驟及整理結果;
    2.構建好的質粒及農桿菌菌株。

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