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植物miRNA過表達/抑制表達載體構建
   MicroRNA (miRNA) 是一類由內源基因編碼的長度約為22 個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子,它們在動植物中參與轉錄后基因表達調控。miRNA的抑制或過表達對于研究基因功能有重要的意義。
miRNA抑制表達載體構建
   目前,主要采用兩種手段達到抑制目的RNA表達或活性的要求,此兩種技術已經在動植物得到應用。 
   1. 化學合成的miRNA inhibitor,用于下調目的細胞中的miRNA ,以實現loss-of function研究。
   2. 利用miRNA target mimicry 技術,設計目標可結合miRNA而無法被miRNA及RISC切割的target mimicry 人工核酸載體,抑制目標miRNA的活性,造成miRNA抑制的效果。
miRNA過表達載體構建
  • 過表達miRNA
      atmiRNA,或過表達天然pri-miRNA,根據需求選擇啟動子及篩選標記。
參考文獻
  Tang G, Yan J, Gu Y, Qiao M, Fan R, Mao Y, Tang X. (2012) Construction of short tandem target mimic (STTM) to block the functions of plant and animal microRNAs. Methods 58(2):118-25.

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